北京2022年5月8日 /美通社/ -- 2022年5月2日，陸道培醫院陸佩華教授（第一作者和共同通訊作者）團隊、河北森朗生物科技有限公司（以下簡稱"森朗"）李建強教授（共同通訊作者）團隊（劉瑩，共同第一作者）、北京大學人民醫院黃曉軍教授（共同通訊作者）合作在血液科國際權威期刊Blood（IF=23.63）發表了題為Naturally Selected CD7 CAR-T Therapy without Genetic Manipulations for T-ALL/LBL: First-in-human Phase I Clinical Trial 的研究論文。
急性(xing)T淋(lin)巴(ba)細(xi)胞白血(xue)病(bing)(T-cell acute lymphoblastic leukemia, T-ALL) 和T淋(lin)巴(ba)母細(xi)胞淋(lin)巴(ba)瘤(liu)(T-cell lymphoblastic lymphoma, T-LBL)是具有高度侵襲性(xing)的(de)T系惡性(xing)腫瘤(liu)。由于正常T細(xi)胞和惡性(xing)T細(xi)胞之間共有的(de)抗原(yuan)性(xing)，目前仍然缺乏針對T細(xi)胞惡性(xing)腫瘤(liu)的(de)獲批CAR-T療法(fa)。
CD7在T-ALL/LBL T細胞表面高度表達，是潛在的CAR-T治療靶點。靶向(xiang)(xiang)CD7的(de)(de)(de)免疫療(liao)法可能會受(shou)到T細胞(bao)自(zi)相殘殺(sha)機制（fratricide）的(de)(de)(de)影(ying)響。因(yin)此(ci)，在既(ji)往研(yan)究中曾采用(yong)CRISPR/Cas9基(ji)因(yin)編輯(ji)技(ji)術和(he)蛋白沉默表(biao)達技(ji)術生產(chan)靶向(xiang)(xiang)CD7的(de)(de)(de)CAR-T細胞(bao)。但是(shi)，基(ji)因(yin)編輯(ji)技(ji)術會使得CD7 CAR-T細胞(bao)的(de)(de)(de)生產(chan)成本增加。此(ci)外，使用(yong)患者(zhe)自(zi)體(ti)T細胞(bao)制造CD7 CAR-T細胞(bao)仍然具有(you)一定難度。雖然供者(zhe)來源或(huo)通用(yong)型CD7 CAR-T是(shi)一種(zhong)選擇，但尋(xun)找合適的(de)(de)(de)供體(ti)、異體(ti)CAR-T在體(ti)內擴增能力及持續時間等問題仍有(you)待解決(jue)。
針對上述難題，本研究開展探索，使用了森朗生物研發的患者或供者來源的，無需額外進行CD7基因編輯或蛋白質表達阻斷的"自然選擇（Naturally Selected）"CD7 CAR-T細胞(NS7CAR)的新產品，并在1項針(zhen)對(dui)T-ALL/LBL患者的1期臨床(chuang)試驗中首次探索了NS7CAR療法在人體內的安全性和有效性。
臨床前研究
研究(jiu)者使用(yong)三種(zhong)不同(tong)的方(fang)法(fa)制造了(le)靶向CD7的CAR-T細(xi)(xi)胞(bao)并比較它們的功能：1)NS7CAR：通過用(yong)7CAR轉(zhuan)(zhuan)導(dao)總T細(xi)(xi)胞(bao)，然后對其進行"自然選擇"的細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養方(fang)式獲得；2)Neg7CAR：由天然存在(zai)的CD7陰性T細(xi)(xi)胞(bao)（占CD3+T細(xi)(xi)胞(bao)的3%-10%）用(yong)7CAR進行純化和轉(zhuan)(zhuan)導(dao)后進行生產；3)KO7CAR：通過將7CAR轉(zhuan)(zhuan)導(dao)到使用(yong)CRISPR/Cas9RNP敲除CD7基因的總T細(xi)(xi)胞(bao)進行制造。
在2周(zhou)的(de)(de)培養期間(jian)內，NS7CAR的(de)(de)細(xi)胞(bao)擴增(zeng)倍(bei)數顯著低于(yu)(yu)Neg7CAR和KO7CAR的(de)(de)擴增(zeng)倍(bei)數；然而，有87.3%的(de)(de)NS7CAR是活細(xi)胞(bao)，使得進一(yi)步研究成為可能。在收獲時，NS7CAR組(zu)(zu)中平均92.4%的(de)(de)T細(xi)胞(bao)表達7CAR分子(zi)，顯著高于(yu)(yu)Neg7CAR或KO7CAR（p<0.0001)。在7CAR慢病毒轉導三天后，NS7CAR組(zu)(zu)中的(de)(de)T細(xi)胞(bao)發生(sheng)了從CD7+CAR-到CD7-CAR+的(de)(de)快速而顯著的(de)(de)表型轉變。
一(yi)個有趣的(de)(de)發(fa)現(xian)是，盡管NS7CAR組中的(de)(de)T細胞(bao)在(zai)體外(wai)培養后用流式未(wei)檢(jian)測(ce)到(dao)(dao)CD7的(de)(de)表(biao)(biao)(biao)(biao)面表(biao)(biao)(biao)(biao)達，但(dan)使用RT-PCR和(he)(he)WesternBlot檢(jian)測(ce)到(dao)(dao)了顯著的(de)(de)CD7mRNA和(he)(he)蛋白質(zhi)的(de)(de)表(biao)(biao)(biao)(biao)達。與此同時，在(zai)Neg7CAR或(huo)KO7CAR細胞(bao)中未(wei)觀察到(dao)(dao)CD7mRNA或(huo)蛋白質(zhi)表(biao)(biao)(biao)(biao)達。這(zhe)些結果表(biao)(biao)(biao)(biao)明，盡管NS7CAR表(biao)(biao)(biao)(biao)達CD7mRNA和(he)(he)蛋白質(zhi)，但(dan)它們在(zai)免疫學上是CD7陰性的(de)(de)，并由(you)于CD7CAR的(de)(de)抗原隱蔽/細胞(bao)內隔(ge)離(li)作(zuo)用而(er)逃脫了自相殘殺(sha)的(de)(de)細胞(bao)殺(sha)傷(shang)機制。這(zhe)一(yi)點在(zai)隨(sui)后的(de)(de)臨(lin)床研(yan)究中，在(zai)CAR-T回輸后第28天(tian)檢(jian)測(ce)到(dao)(dao)患者體內NS7CAR中CD7mRNA的(de)(de)表(biao)(biao)(biao)(biao)達持(chi)續存在(zai)而(er)被進一(yi)步證實(shi)。此外(wai)，相比Neg7CAR和(he)(he)KO7CAR，NS7CAR包含較多的(de)(de)CD8+亞群和(he)(he)中央記憶表(biao)(biao)(biao)(biao)型亞群。
在(zai)體外抗白血病實(shi)驗中(zhong)(zhong)，NS7CAR和(he)KO7CAR對(dui)CCRF-CEM細(xi)胞(bao)均表現出相(xiang)當(dang)的細(xi)胞(bao)毒性(xing)(xing)，并釋(shi)放(fang)高水平的IFN-γ和(he)TNF-α，但Neg7CAR細(xi)胞(bao)的相(xiang)應數值較低(di)。在(zai)動(dong)物實(shi)驗中(zhong)(zhong)，在(zai)CAR-T注射(she)后的前兩周內，NS7CAR和(he)KO7CAR均可(ke)顯著(zhu)降低(di)小鼠模型中(zhong)(zhong)的白血病負擔。這些數據(ju)證(zheng)明了無需額外的基因編輯，直接由(you)7CAR轉導(dao)的總T細(xi)胞(bao)產(chan)生有效的CD7CAR-T的可(ke)行性(xing)(xing)。因此，陸道培醫療團隊(dui)在(zai)1期臨床試驗中(zhong)(zhong)使用NS7CAR-T細(xi)胞(bao)，進一步探索其有效性(xing)(xing)和(he)安全性(xing)(xing)。
臨床研究
‖研究設計
本研究是1項(xiang)開放、單臂(bei)的(de)1期臨床(chuang)研究，目的(de)是評(ping)估NS7CAR對CD7+R/R T-ALL或T-LBL患(huan)者(zhe)(zhe)的(de)安全(quan)性和(he)療效。入(ru)組標(biao)準包括年齡在2至65歲之間的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)，既往至少接受過兩線治療后失敗，且CD7表達≥80%的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)。在NS7CAR輸注后的(de)第28天后，根(gen)據醫(yi)生的(de)考量和(he)患(huan)者(zhe)(zhe)的(de)意(yi)愿，允許進行鞏固性異體造血(xue)干細胞(bao)移植。
‖患者基線數據
此次臨床試驗(yan)，共入組和回輸20名(ming)(ming)(ming)(ming)復發或難治(zhi)性(xing)(R/R) T-ALL/T-LBL患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)，其中包(bao)含14名(ming)(ming)(ming)(ming)R/R T-ALL患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)及6名(ming)(ming)(ming)(ming)R/R T-LBL患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)。3名(ming)(ming)(ming)(ming)患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)為Ph陽(yang)性(xing)或ETP-ALL高危亞(ya)型；11名(ming)(ming)(ming)(ming)患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)存在高危突變或基(ji)因融合。5名(ming)(ming)(ming)(ming)患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)在入組前接(jie)受過移植。患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)接(jie)受了中位數(shu)為4.5線的(de)治(zhi)療。入組時(shi)，17名(ming)(ming)(ming)(ming)患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)的(de)骨髓(sui)腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)比(bi)例中位數(shu)為21.49%；有(you)3名(ming)(ming)(ming)(ming)T-LBL患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)髓(sui)內未見腫(zhong)瘤細(xi)胞(bao)。分別(bie)有(you)5位T-LBL和4位T-ALL患(huan)(huan)(huan)(huan)(huan)者(zhe)有(you)髓(sui)外病(bing)灶(zao)，其中3名(ming)(ming)(ming)(ming)有(you)中樞(shu)受累。
‖臨床產品制備及回輸
研究應用了來源于患者或其移植供者的NS7CAR產品。對于未接受過異基因移植的患者，使用自體CAR-T細胞；對于入組時為移植后復發狀態的患者，在對患者進行綜合評估后確定使用患者自體或移植供者來源的CAR-T細胞。所有患者的NS7CAR產品均成功制備（自體來源，n=18；供者來源，n=2），中位轉染效率為95.10%。NS7CAR產品有更多的CD8+亞群，中位CD4/CD8比例為0.42。在Day0，分別3、16和1名患者接受了低劑量（0.5×106/kg）、中劑量（1-1.5×106/kg）或高劑量（2×106/kg）的單(dan)次(ci)NS7CAR回(hui)輸。
‖療效及安全性
NS7CAR展(zhan)現出(chu)了良好(hao)的(de)安全性(xing)和(he)耐受(shou)性(xing)。1名(ming)患(huan)者未出(chu)現CRS;18名(ming)患(huan)者的(de)CRS≤2級，僅有一(yi)名(ming)患(huan)者出(chu)現3級CRS。2名(ming)患(huan)者發生(sheng)1級ICANS。
同(tong)時，NS7CAR在(zai)(zai)臨床試驗中(zhong)展現了令人(ren)振(zhen)奮的(de)好療效。在(zai)(zai)Day28時，16/17（94.12%）的(de)骨髓(sui)(sui)受累患(huan)者(zhe)(zhe)實現了MRD陰性完全(quan)緩解(jie)；3名(ming)僅有(you)髓(sui)(sui)外(wai)病(bing)灶的(de)T-LBL患(huan)者(zhe)(zhe)也繼續保持了髓(sui)(sui)內CRi的(de)狀態。在(zai)(zai)9名(ming)有(you)髓(sui)(sui)外(wai)病(bing)灶的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)中(zhong)，5名(ming)在(zai)(zai)中(zhong)位時間29天(tian)(tian)時達(da)到(dao)髓(sui)(sui)外(wai)CR。兩(liang)名(ming)有(you)巨大縱(zong)隔腫物（>7cm）的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)在(zai)(zai)第(di)(di)29天(tian)(tian)分別達(da)到(dao)髓(sui)(sui)外(wai)部分緩解(jie)（PR）和疾病(bing)穩定（SD），其中(zhong)PR患(huan)者(zhe)(zhe)在(zai)(zai)第(di)(di)104天(tian)(tian)時，其髓(sui)(sui)外(wai)病(bing)灶進一步縮小。兩(liang)名(ming)有(you)中(zhong)樞神經系統浸潤的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)也分別在(zai)(zai)第(di)(di)15天(tian)(tian)和第(di)(di)28天(tian)(tian)達(da)到(dao)CR。
至(zhi)研究截止(zhi)日期（2021年10月25日），患(huan)者(zhe)(zhe)的(de)中(zhong)位隨(sui)訪(fang)時(shi)間(jian)為(wei)142.5天(tian)(tian)，最長(chang)達311天(tian)(tian)。6/20名(ming)患(huan)者(zhe)(zhe)在(zai)(zai)CAR-T細胞回(hui)輸(shu)(shu)后未(wei)接受額外的(de)抗(kang)白(bai)血病治療或移植(zhi)(zhi)(zhi)，其中(zhong)4人在(zai)(zai)54天(tian)(tian)的(de)中(zhong)位時(shi)間(jian)保持(chi)(chi)無(wu)疾病進展(zhan)。在(zai)(zai)回(hui)輸(shu)(shu)后中(zhong)位時(shi)間(jian)57.5天(tian)(tian)，10名(ming)CR患(huan)者(zhe)(zhe)接受了(le)鞏固性(xing)(xing)橋(qiao)接移植(zhi)(zhi)(zhi)；移植(zhi)(zhi)(zhi)后中(zhong)位隨(sui)訪(fang)時(shi)間(jian)為(wei)210天(tian)(tian)，7/10名(ming)CR患(huan)者(zhe)(zhe)在(zai)(zai)移植(zhi)(zhi)(zhi)后保持(chi)(chi)MRD陰性(xing)(xing)并(bing)持(chi)(chi)續生存。兩名(ming)患(huan)者(zhe)(zhe)因(yin)個人原因(yin)出組(zu)，出組(zu)時(shi)均處于CR。一名(ming)患(huan)者(zhe)(zhe)進行了(le)二次移植(zhi)(zhi)(zhi)，發展(zhan)為(wei)3級(ji)aGvHD，隨(sui)后去世。有4名(ming)未(wei)達到CR或CR后復發的(de)患(huan)者(zhe)(zhe)接受了(le)挽救性(xing)(xing)移植(zhi)(zhi)(zhi)并(bing)全部達到CR。
‖NS7CAR的細胞動力學
NS7CAR擴增起始于回輸后中位數4.5天。CAR中位峰值拷貝數為1.37×105copies/μg DNA，達到峰(feng)(feng)值(zhi)的中(zhong)位(wei)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)為19天(tian)。在末次(ci)(ci)隨訪時(shi)(shi)(shi)(shi)，NS7CAR+DNA中(zhong)位(wei)持續時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)為90天(tian)；在移植后中(zhong)位(wei)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)39.5天(tian)，12/14名(ming)(ming)患者仍(reng)可通過qPCR檢(jian)(jian)測到水平較低的NS7CAR+DNA。對于未橋接移植的6名(ming)(ming)患者，CAR-T細胞在末次(ci)(ci)隨訪中(zhong)仍(reng)可檢(jian)(jian)測到，中(zhong)位(wei)持續時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)為48.5天(tian)。用流式檢(jian)(jian)測的NS7CAR中(zhong)位(wei)峰(feng)(feng)值(zhi)比(bi)例(li)為67.76%，最高(gao)比(bi)例(li)達84.71%；中(zhong)位(wei)峰(feng)(feng)值(zhi)時(shi)(shi)(shi)(shi)間(jian)為17天(tian)。
NS7CAR回輸(shu)后(hou)，患者外周血中惡性和(he)(he)正常CD7+細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)最顯著減少發(fa)生在(zai)(zai)回輸(shu)后(hou)中位時間第7天。在(zai)(zai)CAR-T擴增高(gao)峰(feng)，每位患者的(de)(de)T/B/NK細(xi)(xi)胞(bao)（不包(bao)括CAR+ 和(he)(he)白血病T細(xi)(xi)胞(bao)）的(de)(de)絕(jue)對數量(liang)均顯示出不同(tong)程度(du)的(de)(de)短暫下(xia)降。NS7CAR迅(xun)速消滅了CD7+細(xi)(xi)胞(bao)，并主要保留了CD7陰性細(xi)(xi)胞(bao)亞群。T/B/NK細(xi)(xi)胞(bao)隨后(hou)恢復(fu)(fu)到基(ji)線水平，但就如(ru)所預期的(de)(de)，在(zai)(zai)移(yi)植后(hou)不久出現下(xia)降。在(zai)(zai)移(yi)植后(hou)，正常的(de)(de)CD7+T細(xi)(xi)胞(bao)和(he)(he)NK細(xi)(xi)胞(bao)得到充分恢復(fu)(fu)。
‖總結
該研(yan)究(jiu)(jiu)揭(jie)示(shi)了(le)通(tong)過"自(zi)(zi)然選(xuan)擇(ze)"機制生產(chan)靶向CD7 CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(NS7CAR)。研(yan)究(jiu)(jiu)者發現，雖然流(liu)式無法(fa)檢測(ce)到NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)表面上的(de)(de)(de)CD7分(fen)子，但NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)繼續表達CD7mRNA和蛋(dan)白質的(de)(de)(de)水(shui)平雖然稍低，但與正(zheng)常對照T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)中的(de)(de)(de)水(shui)平是可(ke)(ke)比的(de)(de)(de)。研(yan)究(jiu)(jiu)認為，NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)CD7分(fen)子很可(ke)(ke)能(neng)被CD7CAR抗(kang)原(yuan)掩蓋或(huo)在(zai)(zai)胞(bao)(bao)(bao)(bao)內隔離，大(da)(da)大(da)(da)減少(shao)了(le)NS7CAR-T的(de)(de)(de)表面CD7抗(kang)原(yuan)，避免(mian)了(le)CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)之間的(de)(de)(de)大(da)(da)量自(zi)(zi)相(xiang)(xiang)殘(can)殺(sha)。不能(neng)排除在(zai)(zai)體外"自(zi)(zi)然選(xuan)擇(ze)"過程(cheng)中，少(shao)部分(fen)NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)從自(zi)(zi)相(xiang)(xiang)殘(can)殺(sha)中出現的(de)(de)(de)可(ke)(ke)能(neng)性(xing)。這(zhe)使得(de)NS7CAR-T與真(zhen)正(zheng)的(de)(de)(de)CD7陰(yin)性(xing)的(de)(de)(de)Neg7CAR-T或(huo)KO7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)形成對比。研(yan)究(jiu)(jiu)者提出，許多NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)本身并不是CD7陰(yin)性(xing)，而是功能(neng)性(xing)CD7陰(yin)性(xing)。
因(yin)此，研究(jiu)者提出(chu)假設：由(you)于CAR信號(hao)可(ke)能需要蛋白質復合(he)物(wu)(wu)形成，CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)通過(guo)NS7CAR-T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)表(biao)面的(de)游離CD7CAR與(yu)靶向T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)上(shang)表(biao)達的(de)CD7之間的(de)相互作用(yong)被激活(huo)(huo)，而胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)內CD7-CD7CAR復合(he)物(wu)(wu)不能激活(huo)(huo)T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。與(yu)Neg7CAR和KO7CAR細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)相比，細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)內CD7CAR-CD7相互作用(yong)是否導致CAR信號(hao)減弱,并導致NS7CAR細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)體外擴增程(cheng)度降低仍待(dai)確定。其次，自相殘(can)殺是否在NS7CAR減少擴增中發揮了作用(yong)還有(you)待(dai)進一步研究(jiu)。
在NS7CAR中，存在顯著(zhu)更多(duo)的(de)(de)CD8+中央記(ji)憶(yi)CAR-T細胞，這種CD8偏向性可能(neng)提供更持久的(de)(de)疾病控制。由于NS7CAR的(de)(de)產生不涉及額外的(de)(de)基因編輯，避免了(le)脫(tuo)靶效應(ying)(ying)的(de)(de)潛在風險(xian)。因此，NS7CAR的(de)(de)生物學特性和其生產的(de)(de)便(bian)捷十分有利(li)于其臨(lin)床(chuang)應(ying)(ying)用。
迄今為止，針(zhen)對T細(xi)胞惡性(xing)(xing)血液腫瘤(liu)的(de)(de)(de)(de)靶(ba)向CD7 的(de)(de)(de)(de)CAR-T療法(fa)僅(jin)有有限的(de)(de)(de)(de)臨(lin)床試(shi)驗(yan)和病(bing)例報(bao)告(gao)。NS7CAR可由患(huan)者或(huo)供者的(de)(de)(de)(de)外(wai)周血制備，中位(wei)轉(zhuan)染率大于(yu)95%，且細(xi)胞活(huo)性(xing)(xing)率約(yue)90%。由T系惡性(xing)(xing)血液腫瘤(liu)患(huan)者制備的(de)(de)(de)(de)自體CAR-T細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)主(zhu)要安全顧(gu)慮是細(xi)胞終產(chan)品中的(de)(de)(de)(de)惡性(xing)(xing)細(xi)胞污染。根據每個患(huan)者循環腫瘤(liu)細(xi)胞的(de)(de)(de)(de)表型，使用CD3或(huo)CD4/CD8選擇加上NS7CAR的(de)(de)(de)(de)體外(wai) "自然(ran)選擇 "以及(ji)強大的(de)(de)(de)(de)抗白血病(bing)活(huo)性(xing)(xing)，可以成功(gong)地排(pai)除NS7CAR制備中的(de)(de)(de)(de)惡性(xing)(xing)細(xi)胞。
在(zai)該(gai)臨床(chuang)試驗中，幾(ji)乎所有(you)(you)患者在(zai)第(di)28天(tian)時都達(da)到了MRD陰性(xing)的(de)(de)CR。大(da)部分(fen)有(you)(you)髓外(wai)病(bing)(bing)灶的(de)(de)患者，包(bao)括(kuo)中樞(shu)神經系(xi)統白血病(bing)(bing)患者或彌漫性(xing)髓外(wai)受累的(de)(de)患者，也都能(neng)達(da)到髓外(wai)CR。兩名有(you)(you)巨(ju)大(da)縱膈(ge)腫塊的(de)(de)患者分(fen)別達(da)到了PR和(he)SD。對(dui)于有(you)(you)巨(ju)大(da)腫塊的(de)(de)患者來說(shuo)，可能(neng)需要(yao)更長的(de)(de)時間及聯合治療來實現CR，因為(wei)根據PET-CT評估(gu)，處于PR的(de)(de)患者在(zai)第(di)104天(tian)發現有(you)(you)進一(yi)步的(de)(de)臨床(chuang)改善。
入組該臨(lin)床(chuang)試驗的(de)(de)(de)患者曾(ceng)接受了大量(liang)的(de)(de)(de)既往治(zhi)療。鑒于(yu)CD19 CAR-T治(zhi)療的(de)(de)(de)B-ALL患者復(fu)發(fa)率較高(gao)，而(er)且(qie)T-ALL/LBL比一般B-ALL更具(ju)侵(qin)略性(xing)，該研究允許在(zai)(zai)緩解后進(jin)行(xing)鞏固性(xing)異基(ji)因(yin)造(zao)血干細胞移(yi)植。共有10名骨髓(sui)(sui)和髓(sui)(sui)外CR患者進(jin)行(xing)了鞏固性(xing)異基(ji)因(yin)造(zao)血干細胞移(yi)植，這(zhe)可能限制對于(yu)NS7CAR-T單藥治(zhi)療的(de)(de)(de)持續(xu)性(xing)的(de)(de)(de)評估。盡管如此，在(zai)(zai)中(zhong)位隨(sui)訪時間超過(guo)4.5個(ge)月(yue)(yue)（最長10個(ge)月(yue)(yue)）的(de)(de)(de)情(qing)況下(xia)，NS7CAR回輸后再進(jin)行(xing)異基(ji)因(yin)造(zao)血干細胞移(yi)植組沒(mei)有觀察到(dao)復(fu)發(fa)現象。在(zai)(zai)6名沒(mei)有接受移(yi)植的(de)(de)(de)CR患者中(zhong)，有4名在(zai)(zai)最后一次隨(sui)訪時仍保持CR（中(zhong)位時間1.5個(ge)月(yue)(yue)，最長6個(ge)月(yue)(yue)）。然而(er)，在(zai)(zai)一些未達到(dao)CR或復(fu)發(fa)的(de)(de)(de)患者中(zhong)，觀察到(dao)CD7靶點丟失。
STIL-TAL1融合基因(yin)(yin)與較(jiao)高的(de)復發(fa)率和(he)較(jiao)差的(de)預(yu)后有關(guan)，發(fa)生(sheng)在(zai)高達約25%的(de)T-ALL患者(zhe)中。在(zai)這(zhe)一(yi)研(yan)究(jiu)中，所有3名(ming)STIL-TAL1融合基因(yin)(yin)的(de)患者(zhe)預(yu)后都較(jiao)差，有1名(ming)NR和(he)2名(ming)早期(qi)復發(fa)，表(biao)明單(dan)獨使用CAR-T療法(fa)可能無法(fa)扭(niu)轉其臨床(chuang)結(jie)局。一(yi)旦這(zhe)類患者(zhe)從CAR-T中獲(huo)得CR，應在(zai)治療過程的(de)早期(qi)考慮(lv)進行移植。
NS7CAR-T細胞的擴增在中位第19天達到(dao)峰值，截至最(zui)后一次隨訪時(shi)(shi)，可檢(jian)測(ce)到(dao)NS7CAR-T細胞持(chi)續存在長達195天。12/14名患者在移植后中位隨訪時(shi)(shi)間1.2個月（最(zui)長4.9個月）時(shi)(shi)，仍可通過qPCR檢(jian)測(ce)到(dao)低水平的NS7CAR-T。
NS7CAR表現出卓越的(de)安(an)全性，在(zai)(zai)大多數患者(zhe)中只有輕微的(de)CRS，沒有嚴重(zhong)的(de)神經毒性。在(zai)(zai)該臨床研究(jiu)方(fang)案中，早(zao)期應用托(tuo)珠單抗干預管理(li)，有可能降低(di)嚴重(zhong)CRS的(de)發生。這種(zhong)早(zao)期干預和管理(li)可能在(zai)(zai)減少(shao)CRS方(fang)面發揮了作用。
兩(liang)名曾有異(yi)基因(yin)(yin)造(zao)血(xue)干細胞移植史的(de)(de)(de)患者(zhe)(zhe)在(zai)(zai)回輸(shu)時(shi)使用了來自移植供者(zhe)(zhe)的(de)(de)(de)CAR-T細胞，其(qi)中一(yi)位出(chu)現了輕微的(de)(de)(de)皮(pi)膚排異(yi)反應(ying)。因(yin)(yin)此，應(ying)特別關注此類患者(zhe)(zhe)。14名患者(zhe)(zhe)中有7名接受(shou)了后續(xu)的(de)(de)(de)異(yi)基因(yin)(yin)造(zao)血(xue)干細胞移植，包括(kuo)其(qi)中2名第二次(ci)移植的(de)(de)(de)患者(zhe)(zhe)出(chu)現了GvHD。雖(sui)然在(zai)(zai)這7名回輸(shu)后出(chu)現GvHD的(de)(de)(de)患者(zhe)(zhe)中仍可檢測到極低水平的(de)(de)(de)CAR-T細胞，但是不太(tai)可能是導致GvHD的(de)(de)(de)原因(yin)(yin)。
小結
在該研究中，NS7CAR在體(ti)外和體(ti)內(nei)均表現(xian)出強(qiang)大的抗腫瘤(liu)作(zuo)用。NS7CAR的首(shou)次人體(ti)臨床試驗表明，無需額外的基(ji)因編輯即可防(fang)止(zhi)CD7表達，并(bing)成功生產NS7CAR-T細胞。總(zong)體(ti)而言，NS7CAR對治(zhi)療R/R T-ALL/LBL是(shi)安全且高效的。
